細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

pfeiffer 細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持pfeiffer 細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 pfeiffer 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于pfeiffer 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640基礎培養(yǎng)基                           445 mL

特級胎牛血清                                          50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒

humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7試劑盒人周期素依賴性激酶7(CDK-7)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織GSK3α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA 試劑盒

Human tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒

HumanMethylaseELISAKit 人甲基化酶(Methylase)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH試劑盒人免疫反應性生長激素(irGH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

蛋白酶體抑制劑亞基PI31抗體

趨化樣因子受體1抗體

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)

CD97重組人 CD97 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白

ACVR2B Protein Human 重組人 ACVR2???

pfeiffer 細胞專用培養(yǎng)基GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

ING5 Protein Human 重組人 ING5 蛋白 (GST 標簽)

IL18R1重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)

CAMKV重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標簽) Protein