細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

4T1/ OVA細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持4T1/ OVA細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 4T1/ OVA細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于4T1/ OVA細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基                        445 mL

特級胎牛血清                                       50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒

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HumancyclophilinA,CyPA試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人粘蛋白3(MUC3)ELISA 試劑盒

Human tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒

HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人組織蛋白去乙酰化酶(HD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAP試劑盒人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量試劑盒20次

Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor，LIFRELISAKit人白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂多糖試劑盒   人脂多糖試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂多糖試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂多糖試劑盒、人脂多糖試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒   人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒、人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人脂蛋白脂酶試劑盒   人脂蛋白脂酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂蛋白脂酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋白脂酶試劑盒、人脂蛋白脂酶試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人脂蛋脂酶A2試劑盒   人脂蛋脂酶A2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂蛋脂酶A2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋脂酶A2試劑盒、人脂蛋脂酶A2 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

等電壓依賴性陰離子通道（內(nèi)參）重組兔單克隆抗體

缺氧誘導(dǎo)基因1B蛋白抗體

CTLA4重組小鼠 CTLA4 / CD152 蛋白 Protein

Beta-Amyloid(1-16 0.5mgBeta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽1-16(多肽蛋白)

NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein

ITGA5 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 蛋白

ADAM17 Protein Rat 重組大鼠 ADAM17 蛋白

4T1/OVA 細(xì)胞專用培養(yǎng)基Melamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgMelamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白

ING4 Protein Human 重組人 ING4 蛋白

EPHA4重組食蟹猴 EphA4 蛋白 Protein

EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白

FES重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein