?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。

CHL 細胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

CHL細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持CHL細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 CHL細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于CHL 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                        445 ml

特級胎牛血清                            50 ml

 運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

小鼠胃動素(MTL)ELISA pcr檢測試劑盒

Human phospholipase C (PLC) ELISA Kit 人0酯酶C(PLC)試劑盒

HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 人孤腓肽(OFQ/N)pcr檢測試劑盒分裝

ChickenIerleukin1β,IL-1β試劑盒雞白介素1β(IL-1β)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞GSK-3BETA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒

People gathered protein (Agrin) ELISA Kit 人聚集蛋白(Agrin)試劑盒

Porcinesodium-glucosecoanspoer1,SGLT1ELISAKit 豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(SGLT1)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforALP(Humanalkalinephosphatase)ELISAKit人堿性0酸酶

血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit小鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠纖連蛋白試劑盒   小鼠纖連蛋白試劑盒      小鼠纖連蛋白試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠纖連蛋白試劑盒、小鼠纖連蛋白試劑盒

小鼠胃腸癌標志物試劑盒   小鼠胃腸癌標志物試劑盒      小鼠胃腸癌標志物試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠胃腸癌標志物試劑盒、小鼠胃腸癌標志物試劑盒

小鼠lisa試劑盒   小鼠試劑盒      小鼠試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠試劑盒、小鼠lisa試劑盒

小鼠網(wǎng)膜素試劑盒   小鼠網(wǎng)膜素試劑盒      小鼠網(wǎng)膜素試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠網(wǎng)膜素試劑盒、小鼠網(wǎng)膜素試劑盒

液泡蛋白分選蛋白25抗體

PE標記小鼠CD152單克隆抗體

TCN2重組人 TCN2 蛋白 Protein

血小板衍生生長因子A(PDGFA)重組蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)

HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CDK2 Protein Human 重組人 CDK2 / p33 蛋白

RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/???

CHL 細胞專用培養(yǎng)基血小板衍生生長因子A(PDGFA)重組蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)

CDK2 Protein Human 重組人 CDK2 / p33 蛋白

TCN2重組人 TCN2 蛋白 Protein

RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV Fusion protein / RSV-F (Strain RSS-2) 蛋白

HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein