細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀(guān)察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

Z-138細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持Z-138細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含Z-138細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于Z-138細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

IMDM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                445 ml

特級(jí)胎牛血清                                   50 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀(guān)察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠A(VA)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒

Rat osteonectin (ON) ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白(ON)試劑盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

ChickenLeinizingHormone,LH試劑盒雞促黃體激素(LH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞NFKAPPABP50蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit小鼠游離三甲狀腺原(Free-T3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒

Oxidized low density lipoprotein aibody against rat (OLAb) ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒

HumanLeishimariaaibodyELISAKit 人利什曼原蟲(chóng)抗體(LeishimariaAb)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

HumanFreeTestoterone,F-TESTO試劑盒人游離睪同(F-TESTO)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織半胱蛋白酶-3(CASPASE-3)活性熒光定量試劑盒20次

HumanNeural-Cadherin,N-CadELISAKit人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠胃動(dòng)素(MTL)試劑盒

小鼠(Pepsin)試劑盒

小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199試劑盒

小鼠K1(VK1)試劑盒

TRIM66蛋白抗體

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2重組兔單克隆抗體

CXADR重組小鼠 CXADR / CAR 蛋白 Protein

骨成型蛋白2(BMP2)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)

PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白 (aa 30-390, His & GST 標(biāo)簽) Protein

CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

TGFB2 Protein Canine 重組狗 TGFB2 / TGF-beta 2 蛋白

Z-138 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基白介素16(IL16)重組蛋白 Recombinant Interleukin 16 (IL16)

CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

IL5重組小鼠 IL5 蛋白 Protein

TSPAN7 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白

PFDN4重組人 PFDN4 / PFD4 蛋白 Protein