樣本采集、存放及運(yùn)輸：

1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；

2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；

3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。

普通PCR反應(yīng)流程：

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100mg左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1mL溶液A中，95℃保溫10-15分鐘，加入0.1mL溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

自備物品：

15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器

比色皿：用于比色的容器

96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器

分光光度儀：用于比色分析

酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析

儲(chǔ)存條件：

14℃或-20℃

準(zhǔn)備物品

清理液（A）毫升

染色液（t B）微升

稀釋液（C）毫升

溶解液（tD）毫升

產(chǎn)品說明書1份

反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度：15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：

引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

2-羥吡分子式：95.1分子量： C5H5NO英文名稱：2- hydroxy pyridineCAS號(hào)：142-08-5

4-分子式：161.25分子量： C11H15N英文名稱：4- phenylpiperidineCAS號(hào)：771-99-3

漢防己乙素英文名稱：FangchinolineCAS號(hào)：436-77-1分子式：608.7233分子量：C37H40N2O6

N'-異丙亞-2-硝磺酰分子式：257.27分子量： C9H11N3O4S英文名稱：N'-, -2-, theCAS號(hào)：6655-27-2

N-(5--2-甲)-4-(3-吡)-2-嘧分子式：277.32分子量： C16H15N5英文名稱：N- (5-) -4- (-2-) -2- (3-)CAS號(hào)：152460-10-1

丹參酚A英文名稱：Salvia miltiorrhiza phenolic acid ACAS號(hào)：96574-01-5分子式：494.447分子量：C26H22O10

[1,3-雙(2,6-二異丙)咪唑-2-甲叉](1,3-二-1,3-丙二酮)銅分子式：675.4分子量： C42H47CuN2O2英文名稱：【3雙（2,6-二異丙）咪唑- 2 -甲叉]（1,3 -二-1,3-丙二酮）銅CAS號(hào)：920739-11-3

TTC英文名稱：TTCCAS號(hào)：分子式：334.8分子量： C19H15ClN4

3,4-二羥甲分子式：124.14分子量： C7H8O2英文名稱：3,4- two hydroxy tolueneCAS號(hào)：452-86-8

4-叔丁吡分子式：135.21分子量： C9H13N英文名稱：4- tert butyl pyridineCAS號(hào)：3978-81-2

馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測(cè)試劑盒方法VSV-G tag  VSV-G tag標(biāo)簽抗體 0.1ml

TNFAIP8  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體 0.2ml

AP-TNAP/ALPL  堿性磷酸酶抗體 0.1ml

Anei-ATX/Autotaxin  自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體 0.1ml

PAGE1  前列腺相關(guān)P抗原家族成員1抗體 0.2ml

C20ORF141  20號(hào)染色體開放閱讀框141抗體 0.2ml

MEI-1  減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 0.2ml

Glycerol kinase  甘油激酶抗體 0.2ml

CHRDL2  乳腺腫瘤新因子1抗體 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

CCR8  細(xì)胞表面趨化因子受體8抗體 0.1ml