反應(yīng)五要素:
傳染性胃腸炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
傳染性胃腸炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                   1份

人腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

NZYM肉湯/NZYM BrothBR100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱：A172

復(fù)達(dá)欣/孢他啶/孢他定/孢噻甲羧肟/孢塔齊定/噻甲酸肟孢菌素/凱復(fù)定/Ceftazidime添加于100mlHB41553毫克/支×5國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

黃芪甲苷規(guī)格：100mg/支；98%

卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂/Lecithin Tween 80 Nutrient Agar妝品檢驗(yàn)中細(xì)菌計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

Tris(三羥甲基氨基甲烷)500g國(guó)產(chǎn)

胰酶細(xì)胞消液規(guī)格：100ml

麥芽浸膏/麥芽浸汁/麥精/Malt extractBR100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

負(fù)鼠腎細(xì)胞英文名稱：OK

傳染性胃腸炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌FLIP/c FLIP  凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.3ml

Goat Anti-human IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml

phospho-SYN1(Ser9)  磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml

VEGF-A  血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A 0.1ml

Testis  腫瘤抑制基因Testin抗體 0.2ml

phgophs-ATG4C(Ser177)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 0.1ml

AEV polyprotein  禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 0.1ml

IQCK  IQCK蛋白抗體 0.2ml

Defensin β2/DEFB2/HBD-2  防御素β2抗體 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

Slc4a7/Nbcn1  氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體 0.2ml