細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

KMB-17細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持KMB-17細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含KMB-17 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于KMB-17 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                   445 mL

特級胎牛血清                                    50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠甘油-3-0酸脫氫酶(GAPDH)試劑盒 ，英文名： GAPDH ELISA Kit

Human paraoxonase (PON) ELISA Kit 人酶(PON)試劑盒

RabbitProgesterone,PROGELISAKit 兔子孕激素/孕酮(PROG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBF(HumanfactorB)ELISAKit人B因子

細菌糖酵解溴百里酚藍(BTB)試劑盒20次

rabbitiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子補體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒

Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanE-Selectin試劑盒人E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織S6KINASE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit人破骨細胞分化因子(ODF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人樁蛋白試劑盒   人樁蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人樁蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人樁蛋白試劑盒、人樁蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人乙脫氫酶試劑盒   人乙脫氫酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人乙脫氫酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人乙脫氫酶試劑盒、人乙脫氫酶試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人   人   規(guī)格型號：96T/48T   人，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人、人   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒   人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒、人心肌錨蛋白重復(fù)域1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Toll樣受體9抗體

磷酸化鐵蛋白Fe65抗體

LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 Protein

DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原

STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR???

KMB-17 細胞專用培養(yǎng)基GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)

IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標簽)

CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白

SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein