CHO-dhfr 細胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

cho-dhfr-細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持cho-dhfr-細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含cho-dhfr- 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于cho-dhfr- 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

IMDM 基礎培養(yǎng)基                       445 ml

特級胎牛血清                               50 ml

 運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存。

小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat calcineurin (CaN) ELISA Kit 大鼠鈣調0酸酶(CaN)試劑盒

HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Bovineacetone試劑盒牛同檢測(acetone)試劑盒規(guī)格：96T/48T

A含量熒光定量試劑盒20次

MouseInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)試劑盒

HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanEsadiol,E2試劑盒人雌二醇(E2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織SPHK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit人孤腓肽(OFQ/N)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人轉錄激活因子4(ATF4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit

人轉錄激活因子6(ATF6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ATF6 (Activating anscription Factor 6) ELISA Kit

人腺苷三0酸結合盒轉運體G1(ABCG1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ABCG1 (ATP Binding Cassette anspoer G1) ELISA Kit

人腺苷三0酸結合盒轉運體A1(ABCA1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ABCA1(ATP Binding Cassette anspoer A1) ELISA Kit

T淋巴細胞易位蛋白2重組兔單克隆抗體

磷酸化星形膠質細胞PEA15抗體

NT5E重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽) Protein

MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A 0.5mgMAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相關蛋白1A抗原

IL2重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 Protein

ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 (His &???

CHO-dhfr 細胞專用培養(yǎng)基AR (Androgen Receptor 0.5mgAR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)

IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白

ACHE重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白 Protein

VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標簽)

ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。