細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

K7M2WT細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持K7M2WT細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含K7M2WT 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于K7M2WT細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                          445 ml

特級胎牛血清                              50 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠白介素4(IL4)試劑盒 ，英文名： IL4 ELISA Kit

Human stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 人干細胞因子受體(SCFR)試劑盒

rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAVP(Humanargininevasopressin)ELISAKit人精加壓素

線粒體蛋白印跡電泳內(nèi)參蛋白抗體(1000倍)20微克

Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit兔子抗中性粒細胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒

Oxidized low density lipoprotein aibody against rat (OLAb) ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒

HumanLeishimariaaibodyELISAKit 人利什曼原蟲抗體(LeishimariaAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanFreeTestoterone,F-TESTO試劑盒人游離睪同(F-TESTO)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織半胱蛋白酶-3(CASPASE-3)活性熒光定量試劑盒20次

HumanNeural-Cadherin,N-CadELISAKit人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)試劑盒規(guī)格：96T/48T

中文名稱   方法   規(guī)格

兔子端粒酶(TE)ELISAKit   ELISA. 

兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISAKit   ELISA. 

兔子促上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISAKit   ELISA.

β晶狀體蛋白B3抗體

磷脂酰肌醇激酶單克隆抗體 (無動物源)

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白  Protein

三葉因子1(TFF1)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)

DHRS9重組人 DHRS9 蛋白 (His 標簽) Protein

ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白

K7M2WT 細胞專用培養(yǎng)基MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)

IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白

TNFSF12重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MERTK Protein Mouse 重組小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 標簽)

TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein