?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。

NCI-N87+luc 細胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

NCI-N87+LUC細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持NCI-N87+LUC細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含NCI-N87+LUC 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于NCI-N87+LUC 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640 基礎培養(yǎng)基                                  435 mL

特級胎牛血清                                            50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存。

小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat myeloperoxidase specificity of ai neuophil cytoplasmic aibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)試劑盒

Humanleoopichormone,LHELISAKit (LH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanClaracellprotein,CC16試劑盒人克拉拉細胞蛋白(CC16)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?/span>(HDAC)總活性比色法定量試劑盒20次

Humaotavirusaigen，RVAgELISAKit人輪狀病毒抗原(RVAg)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠轉酶(ALT)試劑盒 ，英文名： ALT ELISA Kit

Mouse alpha mannosidase (alpha Manase) ELISA Kit 小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)試劑盒

ELISA 小鼠雌二醇(mouse E2)  進口分裝

CLIAKitfoR(Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor)ELISAKit人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體

通用型單核增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)試劑盒20次

ELISAKitTGF-β1大鼠轉化生長因子β1

兔血管細胞粘附分子-1(rabbit VCAM-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔血管內(nèi)皮生長因子(rabbit VEGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔血管性血友病因子(rabbit VWF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔軟骨糖蛋白39(rabbit YKL-40)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

核糖核酸酶3/Drosha抗體

通用轉錄因子IIA樣因子抗體

TNFRSF17重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標簽) Protein

PGA4重組人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein

CTRC Protein Human 重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白

SIGIRR Protein Mouse 重組小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc 屬

NCI-N87+luc 細胞專用培養(yǎng)基發(fā)動蛋白2(DNM2)重組蛋白 Recombinant Dynamin 2 (DNM2)

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

EDA2R重組小鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL23R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標簽)

GADD45G重組人 GADD45G / CR6 蛋白 Protein