細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞 優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞的培養(yǎng)。

平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系           500 ml

產(chǎn)品主要成分

平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基                             440 ml

平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑                             5ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human granulocyte chemotactic protein -2 (GCP-2/CXCL6) ELISA Kit 人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)試劑盒

Humandermatansulfate,DSELISAKit 人硫酸皮膚素(DS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chicken1,3-βDglucosidase,1,3-βD-Glu試劑盒雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)試劑盒規(guī)格：96T/48T

遠(yuǎn)西方雜交(FARWESTERNBLOT)印跡同位素試劑盒5次

MouseIgGELISAKit小鼠IgG試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)試劑盒 ，英文名： STAT6 ELISA Kit

Mouse heat shock protein 60 (Hsp-60) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)試劑盒

Mouseplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit 小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanai-parotidductaibodyELISAKit人抗腮腺管抗體

細(xì)胞FGFR4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitGHR大鼠釋放激素受體

小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒   96T/48T

小鼠血清總補體(CH50)試劑盒   96T/48T

小鼠血清(NO)試劑盒   96T/48T

小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒   96T/48T

雙微體2癌基因結(jié)合蛋白抗體

APC標(biāo)記人CD274 (B7-H1, PD-L1)單克隆抗體

PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

尾加壓素2(UST2)重組蛋白 Recombinant Urotensin 2 (UST2)

RAET1E重組人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD55 Protein Human 重組人 CD55 / DAF 蛋白

HA Protein H1N3 重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基Juxtanodin蛋白(JN)重組蛋白 Recombinant Juxtanodin (JN)

FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

HAVCR1 Protein Rat 重組大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CNPY4重組人 CNPY4 蛋白 Protein