細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

NE-4C細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持NE-4C細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 NE-4C 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于NE-4C細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                 445 mL

特級胎牛血清                                   50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠多巴胺(DA)ELISA 試劑盒

Rat visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒

HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 人血栓素A2(TX-A2)試劑盒分裝

HumanAquaporin3,AQP-3試劑盒人水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒

植物乙酰羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性比色法定量試劑盒20次

Humahyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒

大鼠神經(jīng)介素S(NMS)試劑盒 ，英文名： NMS ELISA Kit

Mouse fibronectin (FN) ELISA Kit 小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒

RatneuropeptideY,NP-YELISAKit 大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)試劑盒分裝

CLIAKitforHBcAb(IgM)乙型肝核心抗體IgM

細胞半胱蛋白酶-2(CASPASE-2)活性比色法定量試劑盒20次

RatVitaminK1,VK1ELISAKit大鼠K1(VK1)試劑盒

細胞松弛素B   `1mg

CytochalasinB,Helmihosporiumdematioideum

   50mg

CytochromeC,frombovinehea

棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶GODZ抗體

博萊水解酶抗體

KIRREL3重組小鼠 KIRREL3 / NEPH2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.1mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(1-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)(抗原)

APOL1重組人 APOL1 / apolipoprotein L1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FCGR3B Protein Human 重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白

IL2RG Protei?翿????

NE-4C 細胞專用培養(yǎng)基催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)重組蛋白 Recombinant Prolactin Induced Protein (PIP)

FCGR3B Protein Human 重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白

PTN重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白  Protein

KLRK1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 標(biāo)簽)

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (aa 176-687, His 標(biāo)簽) Protein