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產(chǎn)品中心

當前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞大鼠腦微血管周細胞
大鼠腦微血管周細胞

產(chǎn)品簡介

大鼠腦微血管周細胞的相關*:小鼠中性粒細胞明膠相關脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
小鼠中性粒細胞彈性蛋白(NE)免疫試劑盒*直銷
小鼠脂氧素A4(LXA4)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠脂聯(lián)素(ADP)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠脂肪酸合成(FASN)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時間:2025-02-20
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:367
詳細介紹在線留言
品牌其他品牌貨號GOY-01X1329
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應用領域化工

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠腦微血管周細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1329

商品介紹:

名稱    大鼠腦微血管周細胞   

2.組織來源:大腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

大鼠腦微血管周細胞分離自腦微血管;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。周細胞(pericyte)又稱Rouget細胞和壁細胞,是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內(nèi)皮細胞的細胞,可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內(nèi)皮細胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細胞進行細胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細胞的成熟過程。此外,周細胞還具有調(diào)控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點之一,所以對血管周細胞的生物學特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料。周細胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細血管的血流量。周細胞和內(nèi)皮細胞之間共同擁有一個基膜,基膜上有多種細胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調(diào)控;毛細血管受損時,周細胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細胞和成纖維細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠腦微血管周細胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠腦微血管周細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R222

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 IL1R1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 IL6ST / gp130 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 LAMP2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 REG1A / PSPS 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 XEDAR / EDA2R 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠腦微血管周細胞一氧化氮合成-2(抗原)Anti-C6 Antibody侖氨西林Lenampicillin

蛇巴曲抗原Anti-CA1 Antibody利福霉素BRifamycin B

一氧化氮合成-3(抗原)Anti-CA12 Antibody6-青霉烷酸6- aminopenicillanic acid

神經(jīng)肽 Y(抗原)Anti-CA12 Antibody鹽酸左Levofloxacin hydrochloride

谷受體(抗原)Anti-CA13 Antibody阿米卡星雜質(zhì)AAmikacin?impurity A

神經(jīng)生長因子-3(抗原)Anti-CA13 Antibody克拉維酸鉀Potassium clavulanate

神經(jīng)生長因子4/5(抗原)Anti-CA13 Antibody鹽酸加替沙星Gatifloxacin hydrochloride

神經(jīng)生長因子(抗原)Anti-CA14 Antibody頭孢孟多酯Cefamandole Nafate

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