鼻黏膜成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
鼻黏膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)：小鼠抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
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小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時(shí)間：2025-02-18

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：477

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品牌	其他品牌	貨號(hào)	GOY-01X1337
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
鼻黏膜成纖維細(xì)胞	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X1337

商品介紹：

名稱 鼻黏膜成纖維細(xì)胞

2.組織來源：鼻粘膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人鼻黏膜成纖維細(xì)胞分離自鼻黏膜組織；黏膜是覆蓋在人體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu)，由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同，有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜，簡(jiǎn)稱鼻黏膜，覆蓋于鼻腔表面，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的人鼻黏膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的人鼻黏膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-H227

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳3-5代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

CLM-9 / TREM4 / CD300LG 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

BTC / Betacellulin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

Siglec-2 / CD22 (aa 176-687) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 Tie2 / TEK 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 CD86 / B7-2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

大鼠 TrkA / NTRK1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 CREG / CREG1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

鼻黏膜成纖維細(xì)胞人H-rasAnti-Phospho PTPN3 (PTPH1)(Ser459) AntibodyAKT蛋白檢測(cè)試劑盒

大鼠α1酸性糖蛋白Anti-Phospho RAD17 (Ser646) AntibodyAP2A2檢測(cè)試劑盒

人c-sisAnti-Phospho RAF1 (Ser301) Antibody脂肪炎癥因子檢測(cè)試劑盒

小鼠一氧化氮合成Anti-Phospho RAF1 (Ser642) Antibodyapelin 12檢測(cè)試劑盒

小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成Anti-Phospho RAPGEF1 (Tyr504) Antibodyapelin 13檢測(cè)試劑盒

大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3Anti-Phospho RB1 (Ser780) Antibodyapelin 36檢測(cè)試劑盒

人c-junAnti-Phospho RHO (Ser334) AntibodyArgonaut-2蛋白檢測(cè)試劑盒

人c-fosAnti-Phospho RPA2 (S33) AntibodyATP檢測(cè)試劑盒

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