細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

DMS 53細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持DMS 53細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含DMS 53細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于DMS 53細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

Waymouth's MB 752/1 medium             (Invitrogen, 11220-035)                 445 mL

特級(jí)胎牛血清                                               

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒

Human cytochrome P450c21B/21- hydroxylase (CYP21B) ELISA Kit 人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)試劑盒

Humanai-Bactericidalpermeabilityincreasingproteinaibody,BPI-AbELISAKit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

HumanCyclosporineA,CsA試劑盒人A(CsA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性試劑盒20次

Humanpokeweedmitogen，PWMELISAKit人美洲商陸素(PWM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人乙型肝病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA 試劑盒

Human tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒

HumanIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

HumanIerleukin5,IL-5試劑盒人白介素-5(IL-5)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織亮(leucine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

HumanIerleukin2，IL-2ELISAKit人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人孕受體試劑盒   人孕受體試劑盒      人孕受體試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人孕受體試劑盒、人孕受體試劑盒

人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒   人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒      人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒、人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ 試劑盒

人孕激素試劑盒   人孕激素試劑盒      人孕激素試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人孕激素試劑盒、人孕激素試劑盒

人1試劑盒   人1試劑盒      人1試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人1試劑盒、人1 試劑盒

防御素β-125/β-defensin 125抗體

乳腺癌抗雌激素耐藥蛋白1

SELE重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

前列腺素E合酶(PTGES)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)

ACOT13重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 Protein

JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N

DMS53 細(xì)胞專用培養(yǎng)基前列腺素E合酶(PTGES)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)

JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

SELE重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

ACOT13重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 Protein