小鼠腎小球上皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
小鼠腎小球上皮細(xì)胞的相關(guān)：豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒直銷(xiāo)
豬甘油醛-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
豬鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激2δ(CAMK2D)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
豬鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激2γ(CAMK2G/CAMKG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時(shí)間：2025-02-16

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

訪問(wèn)量：395

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產(chǎn)品分類(lèi)

技術(shù)文章

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貝類(lèi)過(guò)氧化氫酶ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟

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品牌	其他品牌	貨號(hào)	GOY-01X1303
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
小鼠腎小球上皮細(xì)胞	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X1303

商品介紹：

名稱 小鼠腎小球上皮細(xì)胞

2.組織來(lái)源：腎組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠腎小球上皮細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維D3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小球是腎元中的用于將血液過(guò)濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球。腎小球上皮細(xì)胞是由間充質(zhì)細(xì)胞分化發(fā)育、襯貼于腎小球血管腔的單層扁平上皮細(xì)胞，是腎小球的固有細(xì)胞之一，也是構(gòu)成腎小球?yàn)V過(guò)膜的重要組成部分。腎小球上皮細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)和功能是腎單位濾過(guò)及腎小球微環(huán)境穩(wěn)定的重要保障。腎小球?yàn)V過(guò)膜的最外層為上皮細(xì)胞層，厚約40nm，腎小球上皮細(xì)胞是腎小囊的臟層上皮細(xì)胞，貼附于腎小球血管外側(cè)基底膜上。上皮細(xì)胞又稱足細(xì)胞，足細(xì)胞的不規(guī)則突起為足突，其間有許多狹小間隙，血液經(jīng)濾過(guò)膜過(guò)濾入腎小球囊。腎小球上皮細(xì)胞可通過(guò)合成和分泌腎上腺髓質(zhì)肽抑制系膜細(xì)胞增殖，腎上腺髓質(zhì)肽作為一種重要的旁分泌因子，可保持腎小球微環(huán)境穩(wěn)定，并參與腎小球的炎癥過(guò)程。體外培養(yǎng)的腎小球上皮細(xì)胞對(duì)各型腎小球腎炎具有重要的研究?jī)r(jià)值。

5.方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M209

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

HCST / DAP10 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

LRP11 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

FAM171B / KIAA1946 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

Statherin / STATH 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

TMUB2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

SUSD4 / Sushi domain-containing 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

SCG2 / Secretogranin II 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

BTN3A3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

LRG1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠腎小球上皮細(xì)胞Candida tropicalis白介素5檢測(cè)試劑盒

Pseudozyma hubeiensis白介素7檢測(cè)試劑盒

Saccharomyces cerevisiae白介素8檢測(cè)試劑盒

Saccharomyces cerevisiae白介素9檢測(cè)試劑盒

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Metschnikowia zizyphicola白血病抑制因子檢測(cè)試劑盒

Candida sp.半胱蛋白1檢測(cè)試劑盒x

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