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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞雞骨骼肌細(xì)胞
雞骨骼肌細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

雞骨骼肌細(xì)胞的相關(guān)*:組織5’-核苷酸(5’-NT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
血液5’-核苷酸(5’-NT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
細(xì)胞α-L-巖藻糖苷(AFU)比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
組織α-L-巖藻糖苷(AFU)比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
血液α-L-巖藻糖苷(AFU)比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
體液α-L-巖藻糖苷(AFU)比色法定量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時(shí)間:2025-02-16
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:388
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品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X0729
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

雞骨骼肌細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0729

商品介紹:

名稱    雞骨骼肌細(xì)胞   

2.組織來(lái)源:骨骼肌組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

雞骨骼肌細(xì)胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長(zhǎng)柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長(zhǎng)軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段,叫做一個(gè)肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞也稱橫紋肌細(xì)胞,細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方,細(xì)胞多呈梭行,具有一定的方向性。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的雞骨骼肌細(xì)胞采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的雞骨骼肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-C011

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 CXCL4 / PF4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 GLIPR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 CD120a / TNFRI 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 ACVR1C / ALK-7 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 LAIR2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 EGFL6 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 CHRDL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 PLA2G1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 HDAC8 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 INSL3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

雞骨骼肌細(xì)胞溶血(0.1%)赫氏瓊脂 英文名稱:Hottinger's Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 英文名稱:7.5% NaCl Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ubiquitin-associated protein 2

曲瓊脂基礎(chǔ)(AFPA) 英文名稱:AFPA 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Major histocompatibility complex class I-related gene protein

SSDC培養(yǎng)基(ISO) 英文名稱:SSDC Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

78-5000 pg/mL 人腫瘤壞死因子配合基超家族成員18(TNFSF18)ELISA試劑盒

PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:500ml*20瓶

1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Dynamin-2

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Nestin

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